人白介素ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素水平。用純化的人白介素抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素，再和HRP標(biāo)記的白介素抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。
 

　　人白介素ELISA試劑盒使用時(shí)需要注意的要點(diǎn)：
 

　　1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
 

　　2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
 

　　3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間較好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
 

　　4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，較好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)較后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
 

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
 

　　6.底物請(qǐng)避光保存。
 

　　7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
 

　　8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
 

　　9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
 

　　10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
 

　　人白介素ELISA試劑盒的計(jì)算：
 

　　以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
 

　　試劑盒性能:
 

　　1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。
 

　　2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%